atto發光檢測裝置的應用

發布日期：2022-11-14      瀏覽次數：343

atto發光檢測裝置的應用

基因(yin)表達測量(liang)和報告基因(yin)檢測到ATP和活性氧測量(liang) - 發光檢測設備的應用

化(hua)學發(fa)光和(he)生物發(fa)光廣泛應用于(yu)各個領域，從 ATP 測(ce)定和(he)活性氧(yang)/抗氧(yang)化(hua)能(neng)力測(ce)量(liang)到使用熒光素(su)酶作為報(bao)告基(ji)(ji)因(yin)的基(ji)(ji)因(yin)表達分(fen)析。ATTO 的發(fa)光檢測(ce)設(she)備與從微孔板到試管和(he)培養皿(min)的各種(zhong)樣(yang)品格式兼容，并用于(yu)生命科學的前沿。

發光測量設備(bei)清單(dan)

型號/產品名稱(cheng)	AB-2550 計(ji)時迪奧(ao)	AB-2350 費(fei)利奧斯	AB-2270 八(ba)角發光傳(chuan)感器
樣品(pin)數量	8個樣(yang)品	96/384 個樣本	1 個樣品
探測器	光(guang)電倍增管（PMT）	光電倍增管（PMT）	光電倍增管（PMT）
檢測方法	光子計數	光子計數	光子計數(shu)
容(rong)器	φ35mm培養皿	微(wei)孔(kong)板96孔(kong)/384孔(kong)	φ12mm x 55mm管 1.5mL離心管
溫控功能	室溫(wen)-5℃～45℃	室溫+5℃～40℃	室溫(wen)+5℃~40℃（可選）
CO2氣體介紹	○（5%調整）	×	×
保濕(shi)	○	×	×
試(shi)劑分配	×	○	○
分色(se)功能	○	○	○
設備控制	電腦(nao)控制	電腦(nao)控制	主(zhu)體面板(ban)

報(bao)告基因檢測

報告基(ji)(ji)(ji)因(yin)檢測(ce)是基(ji)(ji)(ji)因(yin)表(biao)達分析方法(fa)之一(yi)，當(dang)使(shi)(shi)用熒(ying)光(guang)(guang)素(su)酶作為報告基(ji)(ji)(ji)因(yin)時(shi)，稱(cheng)為熒(ying)光(guang)(guang)素(su)酶檢測(ce)。通過使(shi)(shi)用熒(ying)光(guang)(guang)素(su)酶進(jin)行(xing)基(ji)(ji)(ji)因(yin)表(biao)達分析，可以根(gen)據(ju)發(fa)光(guang)(guang)量來定量檢測(ce)目標基(ji)(ji)(ji)因(yin)的(de)表(biao)達水平。



熒(ying)光(guang)素酶測定（單次）

一種基本(ben)的熒(ying)(ying)光素(su)酶測定(ding)方(fang)法。許多都(dou)以(yi)套件形式提(ti)(ti)供。由(you)于細胞活性(xing)和數量等問(wen)題，比較樣本(ben)之間的數據可能很困難(nan)。因此，存在允許提(ti)(ti)供內標的雙(shuang)熒(ying)(ying)光素(su)酶測定(ding)的趨(qu)勢。

雙熒(ying)光素酶測定

這是一種(zhong)(zhong)使(shi)用(yong)兩(liang)種(zhong)(zhong)類型的(de)熒光(guang)素(su)(su)酶(mei)基(ji)(ji)因的(de)熒光(guang)素(su)(su)酶(mei)測定。通(tong)過將目標基(ji)(ji)因的(de)啟動子與第一熒光(guang)素(su)(su)酶(mei)基(ji)(ji)因連接，并通(tong)過將穩定表達的(de)基(ji)(ji)因的(de)啟動子與第二熒光(guang)素(su)(su)酶(mei)基(ji)(ji)因連接來進行測定，使(shi)用(yong)第二熒光(guang)素(su)(su)酶(mei)作為(wei)內標和(he)樣品，這增加了(le)分(fen)析的(de)可靠(kao)性。之間的(de)數據比較 由于使(shi)用(yong)了(le)兩(liang)種(zhong)(zhong)類型的(de)熒光(guang)素(su)(su)酶(mei)，因此必(bi)須添加兩(liang)次具有不同最佳條件的(de)發(fa)光(guang)底(di)物。

多(duo)色熒光素(su)酶測定

這是一(yi)種(zhong)(zhong)使用兩到(dao)三(san)種(zhong)(zhong)類型(xing)的(de)(de)熒光(guang)(guang)(guang)素(su)酶(mei)(mei)(mei)基因(yin)的(de)(de)熒光(guang)(guang)(guang)素(su)酶(mei)(mei)(mei)測定。對于三(san)種(zhong)(zhong)類型(xing)的(de)(de)熒光(guang)(guang)(guang)素(su)酶(mei)(mei)(mei)，可(ke)(ke)以通過一(yi)次添加一(yi)種(zhong)(zhong)類型(xing)的(de)(de)發(fa)光(guang)(guang)(guang)底物來測量所有基因(yin)表(biao)(biao)達。因(yin)此，可(ke)(ke)以測量同一(yi)樣本(ben)中的(de)(de)內標和(he)兩類基因(yin)的(de)(de)表(biao)(biao)達。另外，不存在因(yin)條(tiao)件變(bian)化而導致發(fa)光(guang)(guang)(guang)量變(bian)化的(de)(de)問題。由(you)于同時發(fa)出三(san)種(zhong)(zhong)顏色，因(yin)此儀器需要分色測量機構。各種(zhong)(zhong)熒光(guang)(guang)(guang)素(su)酶(mei)(mei)(mei)測定的(de)(de)測壓儀兼容性表(biao)(biao)

熒光素酶(mei)測定（活細胞測定）

這是(shi)一種(zhong)在(zai)培養細(xi)(xi)胞的同時測量細(xi)(xi)胞而不破壞細(xi)(xi)胞的方法。通過使用添加了降解促進信號(hao)（例如PEST序列）的熒光(guang)素酶(mei)基因(yin)，可以縮(suo)短細(xi)(xi)胞內熒光(guang)素酶(mei)的壽命(ming)，從而提(ti)高其跟蹤(zong)啟動子活性(xing)變化(hua)的能力。

這是一種在(zai)培養細(xi)(xi)胞的(de)同時測(ce)量細(xi)(xi)胞而(er)不破壞細(xi)(xi)胞的(de)方法。通過(guo)使用(yong)添加(jia)了降解(jie)促進信(xin)號（例如PEST序列）的(de)熒光素(su)酶基(ji)因，可以縮短(duan)細(xi)(xi)胞內熒光素(su)酶的(de)壽命，從而(er)提(ti)高其(qi)跟(gen)蹤(zong)啟動(dong)子活性變化的(de)能力(li)。

各(ge)種熒光素酶(mei)測定的測壓儀兼容(rong)性表

測(ce)量方法	AB-2270	AB-2270-R	AB-2350	AB-2550	AB-3000B
熒光(guang)素酶測(ce)定	○	○	○	○	○
雙熒光(guang)素酶測定(ding)	○	○	○	×	×
多色(se)熒光素酶測(ce)定	○	○	○	○	○
活(huo)細胞測定(ding)	×	×	△	○	○























活性氧測量

活性氧測(ce)量



應用(yong)實例

• 中性粒細(xi)胞和巨噬細(xi)胞活性氧產生能力的評價

• 活性氧(yang)清除系(xi)統(tong)（超氧(yang)化(hua)物歧化(hua)酶、過氧(yang)化(hua)氫酶等(deng)）的(de)測(ce)量

• 活性氧生成系統（NAD(P)H氧化酶(mei)(mei)、氧化酶(mei)(mei)等）的(de)測定

用于發光測(ce)量的測(ce)壓儀兼容(rong)性(xing)表

測量方法	AB-2270	AB-2270-R	AB-2350	AB-2550
活性氧(yang)測量(liang)	○	△	○	○

*：對于 AB-2270/AB-2270-R，我們建(jian)議添加可選(xuan)的溫度控制功能。

抗(kang)氧(yang)化能力測(ce)量



■抗(kang)氧(yang)化能力測(ce)量(liang)的基本(ben)概念 (a)：[用(yong)產(chan)生(sheng)一定量(liang)超氧(yang)化物的系統(tong)（例(li)如(ru)次氧(yang)化酶系統(tong)）測(ce)量(liang)發(fa)光(guang)強度(du)] (b)：[將抗(kang)氧(yang)化劑(ji)樣品添(tian)加(jia)到(dao) (a) [測(ce)量(liang)添(tian)加(jia)后(hou)的發(fa)光(guang)強度(du)] 根(gen)據這兩個值(zhi)計算抑制率(lv)。

抑制率(%)=[1-(b)/(a)]×100

用于發光測量的測壓儀兼容性表

測量方法	AB-2270	AB-2270-R	AB-2350	AB-2550
抗氧(yang)化測量	○	△	○	△